Bone marrow stem cell applied in the canine veterinary clinics / Células tronco de medula óssea utilizadas na clínica veterinária canina

Cell therapy represents an old therapeutic practice initiated with the transfusion of whole blood in different clinical situations. There is now a breakthrough in the study of multipotent stem cell therapy because of its functionality in regeneration of tissues, which promotes attention of the scientific community. Bone marrow is one of the main sources of multipotent stem cells, composed by hematopoietic stem cells responsible for the renewal of the cellular components of the blood, and mesenchymal stem cells that aid in the regeneration of tissues. These cells have a strong potential for the treatment of several diseases, due their main characteristics such as high plasticity, capacity for self-renewal and immunomodulation. Although, there are many studies that show good results with the use of cell therapy as a form of treatment for several diseases, some studies still show inconclusive or unsatisfactory results. Therefore, the objective of this study was to review the application of bone marrow stem cells in the canine model since improvements on the knowledge of the technique are necessary to enable its applicability with safety and efficacy.(AU)

A terapia celular representa uma antiga prática terapêutica iniciada com a transfusão de sangue total em diferentes situações clínicas. Atualmente há um avanço no estudo da terapia com células-tronco mesenquimais por conta de sua funcionalidade na regeneração de tecidos, o que promove uma crescente atenção do meio científico. A medula óssea é uma das principais fontes de células-tronco multipotentes, no qual se encontram as células-tronco hematopoiéticas, responsável pela renovação dos componentes celulares do sangue, e as células-tronco mesenquimais que auxiliam na regeneração de tecidos. Essas células têm um forte potencial para o tratamento de diversas enfermidades, uma vez que possuem como principais características alta plasticidade, capacidade de auto renovação e imunomodulação. Apesar de haver muitos trabalhos que apresentam bons resultados com a utilização da terapia celular como forma de tratamento para diversas enfermidades, alguns estudos ainda demonstram resultados inconclusivos ou não satisfatórios, por isso, objetivou-se com este trabalho revisar a aplicação das células-tronco derivadas da medula óssea no modelo canino uma vez que é necessário melhorias sobre o conhecimento da técnica para que possibilite a sua aplicabilidade com segurança e eficácia.(AU)

Maintenance of brazilian biodiversity by germplasm bank / Manutenção da biodiversidade brasileira através de bancos de germoplasma

Currently the importance of using alternative strategies for biodiversity conservation is emphasized and since the establishment of germplasm bank is an alternative to the conservation of endangered species. This is a technique of great importance for the maintenance of Brazilian fauna. Since the early70'sthere was a growing concern about the need to preserve essential genetic resources for food and agriculture, mainly for conservation of genetic material from farm animals. Thus was created the Brasilia Zoo, in July 2010, the first Germplasm Bank of Wild Animals in Latin America, as an alternative strategy for the conservation of threatened or endangered species, using both gametes and somatic cells and stem cells. Then we argue to create new banks or research networks among different regions with aimed to tissue preservation.

Atualmente, a importância do uso de estratégias alternativas para a preservação da biodiversidade é ressaltada e, visto que a criação de bancos de germoplasma é uma alternativa para a conservação de espécies ameaçadas, esta é uma técnica de suma importância para a manutenção da fauna brasileira. Desde o começo da década de 70 houve uma crescente preocupação sobre a necessidade de se preservar recursos genéticos essenciais para alimentação e agricultura, voltados principalmente, para a conservação de material genético de animais de produção. Deste modo, foi criado pelo Jardim Zoológico de Brasília, em julho de 2010, o primeiro Banco de Germoplasma de Animais Selvagens da América Latina, como uma estratégia alternativa para a conservação de espécies ameaçadas ou em perigo de extinção, utilizando tanto gametas como células somáticas e células-tronco. Com isto ponderamos na criação de novos bancos ou redes de pesquisa inter-regionais que foquem nesta preservação tecidual.

Kinematic gait analyses in healthy Golden Retrievers / Análise cinemática da marcha de cães Golden Retriever saudáveis

Kinematic analysis relates to the relative movement between rigid bodies and finds application in gait analysis and other body movements, interpretation of their data when there is change, determines the choice of treatment to be instituted. The objective of this study was to standardize the march of Dog Golden Retriever Healthy to assist in the diagnosis and treatment of musculoskeletal disorders. We used a kinematic analysis system to analyse the gait of seven dogs Golden Retriever, female, aged between 2 and 4 years, weighing 21.5 to 28 kg, clinically normal. Flexion and extension were described for shoulder, elbow, carpal, hip, femorotibialis and tarsal joints. The gait was characterized lateral and had accepted hypothesis of normality for all variables, except for the stance of hip and elbow, considering a confidence level of 95%, significance level α = 0.05. Variations have been attributed to displacement of the stripes during movement and the duplicated number of reviews. The kinematic analysis proved to be a consistent method of evaluation of the movement during canine gait and the data can be used in the diagnosis and evaluation of canine gait in comparison to other studies and treatment of dogs with musculoskeletal disorders.

A análise cinemática relaciona-se com o movimento relativo entre corpos rígidos e encontra aplicação na análise da marcha e de outros movimentos do corpo. A interpretação de seus dados, quando há alteração, determina a escolha do tratamento a ser instituído. O objetivo deste estudo foi padronizar a marcha do cão Golden Retriever saudável visando auxiliar no diagnóstico e tratamento de afecções músculo esquelética. Neste estudo utilizou-se um sistema de análise cinemática para analisar a marcha de sete cães da raça Golden Retriever, fêmeas, idade entre 2 e 4 anos, peso variando de 21.5 a 28 kg, clinicamente sadias. Dados morfométricos foram coletados para descrever a população estudada. Variáveis de tempo e distâncias foram mensuradas para descrever a marcha, movimentos de flexão e extensão foram descritos para as articulações do ombro, cubital, cárpica, do quadril, femorotibial e társica. A marcha foi caracterizada lateral e teve hipótese de normalidade aceita para todas as variáveis, exceto para o apoio de quadril e apoio de cúbito, considerando um grau de confiança de 95%, ou seja, nível de significância α = 0.05. As variações foram atribuídas ao deslocamento das tarjas durante o movimento e ao repetido número de avaliações. A análise cinemática provou ser um consistente método de avaliação do movimento durante a marcha canina e os dados obtidos podem ser utilizados no diagnóstico e na comparação em avaliações de marcha para outros estudos e tratamento de cães com afecções musculoesqueléticas.

Effects of ovariectomy on the secretory apparatus in the right atrial cardiomyocytes of middle-aged mice

OBJECTIVE : The aim of the present study was to evaluate the effects of ovariectomy on the secretory apparatus of natriuretic peptides in right atrial cardiomyocytes. METHODS: Nine-month-old mice underwent bilateral ovariectomy or sham surgery. The blood exam of the ovariectomized mice showed results consistent with castrated females. Systolic blood pressure was measured after ovariectomy (9 mo of age) and at the moment of sacrifice (12 mo of age). Fragments of the right atrium were collected and prepared for electron microscopy examination. The following variables were quantified: the quantitative density and area of the natriuretic peptide granules, the relative volume of euchromatin in the nucleus, the number of pores per 10 μm of the nuclear membrane and the relative volumes of the mitochondria and Golgi complex. RESULTS: The cardiomyocytes obtained from ovariectomized mice indicated that the quantitative density and the area of secretory granules of natriuretic peptides were significantly lower compared with the sham-operated mice. Furthermore, there was a decrease in the relative volume of euchromatin, a lower density of nuclear pores, and lower relative volumes of the mitochondria and Golgi complex in the ovariectomized mice compared with the sham-operated mice. These findings suggest a pool with a low turnover rate, i.e., low synthesis and elimination of natriuretic peptides. CONCLUSION: A lack of estrogen caused hypotrophy of the secretory apparatus in right atrial cardiomyocytes that could explain the weak synthesis of natriuretic peptides in mice. Furthermore, one of the mechanisms of blood pressure control was lost, which may explain, in part, the elevated blood pressure in ovariectomized mice. .

Análise microscópica e ultraestrutural das glândulas salivares mandibulares de Procyon cancrivorus / Microscopy and ultrastructural analysis of mandibular salivary glands of Procyon cancrivorus

Devido a importância ecológica dos Procyon cancrivorus, o objetivo deste trabalho foi caracterizar morfologicamente e ultra estruturalmente a glândula salivar mandibular desta espécie. Foram utilizadas 10 pares (direita e esquerda) de glândulas salivares mandibulares de cinco animais adultos. As glândulas salivares mandibulares foram dissecadas e mensuradas com paquímetro de precisão e posteriormente processadas por técnica rotineira de histologia e coradas por HE (hematoxilina e eosina) e Picrossírius. Fragmentos das glândulas foram processados para análise em microscopia eletrônica de varredura (MEV). As glândulas salivares mandibulares direitas e esquerdas de P. cancrivorus apresentaram-se lobuladas, formato ovalado, e posicionadas entre a fossa atlantis e o osso basihyoideum do crânio. Microscopicamente, estas glândulas estavam revestidas por uma cápsula de tecido conjuntivo denso não modelado, a qual adentra a glândula através de septos, dividindo-a em lóbulos. Nos septos de tecido conjuntivo estão presentes vasos sanguíneos e nervos, além de ductos interlobulares excretores. Dentro dos lóbulos das glândulas salivares mandibulares, são encontrados ductos do tipo estriado e intercalar, além de predomínio de ácinos do tipo mucoso. Os resultados permitem concluir que as glândulas salivares mandibulares dos Procyon cancrivorus, seguem o padrão estrutural descrito em outras espécies de mamíferos. No entanto os tipos de ácinos podem variar entre as espécies, sendo, portanto, necessários futuros estudos histoquímicos e de biologia celular para desvendar a importância dessa variação para a espécie aqui estudada, comparando com seu hábito alimentar.

Due to the ecological importance of Procyon cancrivorus, the aim of this study was to characterize morphologically and ultrastructurally the mandibular salivary gland of this specie. We used 10 pairs (right and left) of mandibular salivary glands from five adult animals. The mandibular salivary glands were dissected and measured by precision calipers and later processed by histological routine technique, stained by HE (hematoxylin and eosin) and Picrossirius. Fragments of the glands were processed for analysis by scanning electron microscopy (SEM). The mandibular salivary gland, right and left from P. cancrivorus presents lobulated and oval-shape, and it was positioned between the fossa atlantis and basihyoideum ossis of skull. Microscopically, these glands are lined by a capsule formed by dense irregular connective tissue, which enters into the gland by septa, dividing it into lobules. Into the septa of connective tissue were present blood vessels and nerves, and interlobular excretory ducts. Inside the lobes of the mandibular salivary glands, striatum and intermediate-type ducts are found, and the predominance of mucous acini was observed. The results indicate that the mandibular salivary glands of Procyon cancrivorus, follows the structural pattern described in other mammalian species. However the types of acini may vary among species, and thus further histochemical and cell biology studies are required in order to uncover the significance of this variation for the specie here studied, according with their feeding habit.

Morfologia macro e microscópica das papilas linguais do quati (Nasua nasua) / Gross and microscopic morphology of the coati tongue (Nasua nasua)

O quati (Nasua nasua) é um animal que pertence à Família Procyonidae. Foram utilizados três animais ortotanasiados, de ambos os sexos, provenientes do Criatório Científico de Animais Silvestres, Centro Universitário Fundação de Ensino Octávio Bastos (Cecrimpas, Unifeob) autorizado pelo IBAMA (Proc.02027.003731/04-76). Para a análise macroscópica, as línguas foram retiradas, analisadas e foto-documentadas. Para análise microscópica, as línguas foram processadas rotineiramente pela técnica de microscopia eletrônica de varredura e inclusão em Paraplast; pela técnica de microscopia de luz os fragmentos foram cortados em micrótomo, com espessura média de 5mm e corados em HE e Picrosírius com fundo de hematoxilina. Os resultados macroscópicos e microscópicos mostram que a língua do quati apresenta papilas filiformes, fungiformes, valadas e cônicas sendo estas distribuídas nas regiões rostralis, medialis e caudalis. Histologicamente, a língua do quati é revestida por um epitélio pavimentoso estratificado queratinizado apresentando camada basal, espinhosa, granulosa e córnea com fibras de músculos estriados esqueléticos longitudinais e transversais e diversas glândulas. De acordo com os resultados pode-se concluir que a língua do quati possui características macroscópicas e microscópicas semelhantes aos canídeos, tendo como diferença o número de papilas valadas e o grau de queratinização.

The coati (Nasua nasua) is an animal that belongs to the Procyonidae family. For this study we used three orthotanasized animals of both sexes, obtained from the Scientific Center for Wild Animal Breeding, University Center Octavio Bastos Educational Foundation (Cecrimpas, Unifeob), authorized by IBAMA (Proc.02027.003731/04-76). For microscopic analysis, tongues were processed routinely through electron microscopy scanning and inclusion in Paraplast; for light microscopy, the fragments were cut by microtome with an average thickness of 5mm and stained with H&E and Picrosirius counterstained with hematoxylin. The macroscopic and microscopic results show that the tongue of coati has filiform, fungiform, vallate and conical papillae distributed in the rostralis, medialis and caudalis regions. Histologically, the tongue is lined by a keratinized stratified squamous epithelium with spinous, granulous and keratin basal layer, with striated longitudinal and transverse skeletal muscles fibers, and several glands. We can conclude that coati´s tongue has macroscopic and microscopic features similar to the ones of Canidae, with differences in the number of vallate papillae and degree of keratinization.

Mutações predisponentes à trombofilia em indivíduos de Minas Gerais - Brasil com suspeita clínica de trombose / Predisposing thrombophilic mutations in individuals with clinical suspicion of thrombosis from Minas Gerais, Brazil

A trombose é reconhecidamente uma doença de caráter multifatorial. Sua ocorrência está intimamente relacionada à presença de fatores genéticos e adquiridos que concorrem isoladamente ou em associação para o seu desencadeamento. No entanto, a frequência dos fatores genéticos pode variar de acordo com a origem étnica e com outros aspectos epidemiológicos dos grupos de indivíduos e populações estudadas. No Brasil, dados referentes a indivíduos brasileiros e em especial do estado de Minas Gerais são escassos. O objetivo do presente estudo foi investigar a frequência das mutações fator V Leiden e G20210A no gene protrombina em 1.103 indivíduos com suspeita clínica de trombofilia, empregando a técnica da reação em cadeia da polimerase seguida de restrição enzimática (PCR-RFLP). Os dados foram analisados usando-se o programa Epi Info versão 6.04. A amostra consistiu de 76,16 por cento mulheres e 23,84 por cento homens, com média de idade de 43,06± 14,65. A mutação fator V Leiden foi observada em heterozigose em 7,52 por cento dos indivíduos e em 0,36 por cento em homozigose. A mutação G20210A no gene da protrombina apresentou-se em heterozigose em 5,90 por cento dos indivíduos e em homozigose em 0,18 por cento. O presente trabalho mostra a importância dos testes genéticos conforme o perfil da população analisada, ressaltando informações epidemiológicas da população brasileira e benefícios clínicos.

Thrombosis is known to be a multifactorial disease. Its incidence is directly related to the presence of genetic and acquired factors that concur separately or in association to its appearance. However, the frequency of genetic factors can vary according to ethnic background and with other epidemiological aspects of populations. Data from Brazilian individuals and especially those from the State of Minas Gerais are scarce. The present study aims at investigating the frequencies of the factor v Leiden and the G20210G prothrombin gene mutations of 1103 individuals with clinical suspicion of thrombophilia employing the Polymerase Chain Reaction technique followed by enzymatic restriction (PCR-RFLP). The data were analyzed using the Epi Info computer program version 6.04. The sample constituted of 76.16 percent women and 23.84 percent men, with an average age of 43.06 ± 14.65 years. The factor V Leiden mutation was observed as heterozygosis in 7.5 percent of individuals and as homozygosis in 0.36 percent. The G20210A prothrombin gene mutation appeared as heterozygosis in 5.90 percent of the individuals and as homozygosis in 0.18 percent. The present study shows the importance of genetic tests taking into account the profile of the studied population, and stressing the epidemiological information of the Brazilian population and the clinical benefits.

Prevalence of C282Y and H63D mutations in the HFE gene of Brazilian individuals with clinical suspicion of hereditary hemochromatosis / Prevalência das mutações C282Y e H63D no gene HFE em indivíduos brasileiros com suspeita clínica de hemocromatose hereditária

Classical hereditary hemochromatosis is a recessive autosomal disease related to a systemic iron overload that is frequently related to C282Y and H63D mutations in the HFE gene. In Brazil, reports on HFE gene mutation frequencies are rare, mainly in regards to a representative sample population. This study intended to determine theprevalence of C282Y and H63D mutations among individuals with clinical suspicion of hereditary hemochromatosis. A total of 1955 patients were studied with C282Y andH63D mutations being detected by the polymerase chain reaction technique followed by enzymatic restriction. The sample consisted of 76.6% men and 23.4% women. The highest percentage of analyzed individuals (56.9%) was concentrated in the 41 to 60- year-old age group. Although there were no genic or genotypic differences between genders, a higher number of over 60-year-old women was observed. The C282Y mutation was found as homozygous in 2.9% of the cases and as heterozygous in 10.1%, while the H63D was homozygous in 4.3% and heterozygous in 30.6%. The C282Y and H63D mutant allele frequencies were 0.079 and 0.196, respectively. Thehighest frequency was observed for H63D which was in genetic equilibrium. This work is important to determine the genetic profile of the population with hereditary hemochromatosis in Brazi.

A hemocromatose hereditária clássica (HH) é uma doença autossômica recessiva caracterizada por uma sobrecarga sistêmica de ferro, a qual está freqüentemente relacionada às mutações C282Y e H63D no gene HFE. No Brasil, registros das freqüências das mutações no gene HFE são raros, principalmente envolvendo uma amostra representativa da população. Este estudo teve como objetivo a determinação da prevalência das mutações C282Y e H63D em indivíduos com suspeita clínica de HH. Para isto, foram estudados 1955 pacientes para os quais as mutações C282Y e H63Dforam pesquisadas pela técnica de Reação em Cadeia da Polimerase seguida de digestão enzimática. A amostra consistiu de 76,6% homens e 23,4% de mulheres. A maioria dos indivíduos analisados (56,9%) estava concentrada no grupo de 41 a 60 anos. Embora não tenham sido observadas diferenças gênicas e genotípicas entreos gêneros, foi observado um maior número de mulheres na faixa etária acima dos 60 anos A mutação C282Y estava presente em homozigose em 2,9% dos indivíduos e em heterozigose em 10,1%, enquanto H63D estava presente em homozigose em 4,3% e emheterozigose em 30,6% dos indivíduos estudados. As freqüências dos alelos mutantes C282Y e H63D foram de 0,079 e 0,196, respectivamente. Além de mais freqüente entre a população estudada, a mutação H63D mostrou equilíbrio genético, ao contrário da mutação C282Y. Este trabalho tem como importância a determinação do perfil genético da população acometida pela HH no Brasil.